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草莓脱毒与组培快繁技术实例 · 含配方

草莓


草莓的繁殖主要采用匍匐茎分株繁殖,虽然繁殖容易,但效率较低,占地多,易遭受病毒侵害,引起品种退化,影响产量和品质。应用组织培养技术不仅能够快繁优质草莓种苗,利于品种的提纯和更新,而且能够脱除草莓体内的病毒。

草莓(Fragaria spp.)为蔷薇科多年生草本植物,是重要的浆果植物。其果实颜色鲜艳、营养丰富,可鲜食,是良好的配餐食品,也可加工成果酱、果酒等。其促成栽培的迅速发展,填补了水果的淡季市场。



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脱毒苗繁育工艺流程

脱毒苗繁育工艺流程如图4-15所示。



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脱毒与快繁技术

2.1 热处理脱毒

草莓植株先栽种于用热处理的特定容器内生长1~2个月,使其根系健壮生长,以增加对高温的抵抗能力。然后放人恒温箱中,保持光照16 h/d,光照强度5000 lx,昼温38℃,夜温35℃。处理的时间因病毒种类而异。如38℃的恒温培养12~15 d即可脱去草莓斑驳病毒;草莓轻型黄斑病毒和草莓镶脉病毒,因耐热性强,需在38℃恒温条件下处理50 d热处理之后再进行微茎尖培养则脱毒比较彻底,即便所取微茎尖稍大一点,也可以培育出无病毒苗,且能提高外植体的成活率。



2.2 微茎尖培养脱毒与快繁

2.2.1 外植体的选择与处理。

取经过热处理的草莓母株上新抽出的匍匐茎作外植体,以每年6~7月 很为适宜。如果母株没有经过热处理,则于7~8月匍匐茎发生 很旺盛的时期,在无病虫害的田块,连续晴天3~4 d时选取生长健壮、新萌发且未着地的3 cm长匍匐茎梢作外植体。然后用肥皂水洗刷,流水冲洗2 h,剥去外层叶片,75%的酒精浸泡30 S,除去表面的蜡质,2%~3%次氯酸钠溶液(加数滴0.1%吐温20或吐温80)浸泡15~20 min,无菌水冲洗3~5次进行材料表面灭菌, 很后用无菌滤纸吸干表面水分。在无菌条件下借助解剖镜将芽外面的幼叶和部分叶原基除去,使生长点暴露,然后用解剖刀切下带有1~2个叶原基、0.2~0.5 mm大小的微茎尖,迅速接入MS、BA 0.5 mg/L,NAA 0.25 mg/L或White、IAA 0.1 mg/L的初代培养基上。


2.2.2 初代培养。

微茎尖接种后,放置于25±2℃、光照16~18 h/d,光照强度2000~3000 lx的条件下培养。1~2个月后茎尖生长并分化出芽丛。若在低温和短日照条件下,茎尖可能进入休眠,所以应保持较高的温度和充足的光照时间。

2.2.3 继代培养。

将芽丛切割成有3~4个芽的芽丛转入MS、6-BA 1 mg/L继代培养基上,每瓶放置3~4个芽丛,经过3~4周的培养可获得由30~40个腋芽形成的芽丛。在转接过程中,去掉原生叶片有利于新苗的分化;增殖培养中随时清除愈伤组织,有利于芽苗的增殖和生长。在转入生根培养基前一次继代培养时,改换培养基为MS、6-BA 0.5 mg/L,以利于形成壮苗。



2.2.4 生根培养。

将长到2cm长的草莓苗接种到1/2 MS、IBA 0.1 mg/L的生根培养基中培养,生根率达100%,平均根条数为2.4条。培养基中不附加IBA或IBA浓度超过0.2 mg/L,多数芽苗都在基部切口处产生愈伤组织,随后在愈伤组织上分化生根,致使成活率大大降低。另外,也可以将具有两片以上正常叶的芽苗在试管外生根。

注意在继代增殖和生根培养时,培养温度控制在18~26℃范围内,瓶苗可以正常生长及发根;而在28℃以上时,绿苗普遍变黄,生根率降低,根尖发黄老化,容易产生玻璃化苗现象。



2.2.5 移栽。

当生根培养15~20 d时,试管苗根多且粗壮。当主根长1.5 cm左右,白色无须根、叶大而厚、深绿,具3片以上叶片时可以驯化移栽。栽培基质为腐熟的锯木屑或腐叶土,也可采用蛭石与珍珠岩配比为1:1或园土与煤渣配比为2:1的复合基质。温室内或塑料拱棚内温度要控制在15~20℃,湿度维持在80%左右为宜。同时由于刚移栽的小苗茎秆脆嫩,应尽量采用喷雾浇水,水量不宜过大,干后再喷。移栽初期遮光50%,1周后逐渐增加光强。这样试管苗移栽成活率可达90%~100%。



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脱毒苗的管理

防止蚜虫的危害:草莓脱毒苗的繁殖要重点防止病毒的再度污染。由于草莓病毒主要是通过蚜虫吸吮汁液而传播的,所以要做好蚜虫防治工作。用马拉松乳剂、氧化乐果乳剂等杀虫剂,防治期在5~6月和9~10月,特别是9~10月防治可阻止蚜虫的越冬。





编者按:本文来自陈莉主编《植物生物工艺学》,中国农业出版社,由小编整理发布,如有不妥,敬请告知!


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