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红景天组培快繁技术实例 · 含配方

红景天:高山红景天为景天科(Crassulaceae)多年生草本或亚灌木,是珍稀药用植物之一。含有丰富的红景天甙、黄酮、多种维生素和微量元素,还含有有机体所必需的17种氨基酸。



近几十年的研究表明,红景天具有抗缺氧、抗寒冷、抗疲劳、抗辐射、抗病毒等多种功能,还具有延缓机体衰老、防止老年疾病的功效,是一种适用于特殊地区的具有很大发展前途的对环境适应性强的药物。高山红景天大多为天然资源,由于其生存环境恶劣,生长缓慢且年产量低,再加上需求量日益增大,使得原本就稀少的野生红景天严重匮乏。通过组培快繁技术,可解决红景天种苗的供应问题。

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无菌培养物的建立

1.1 外植体采集与消毒灭菌

采集红景天幼嫩叶片为外植体诱导愈伤组织。在超净工作台上,先用70%酒精将红景天幼嫩叶片浸泡30s,再用0.1%氯化汞浸泡2~3min,然后用无菌水冲洗3~5次,再用无菌滤纸将外植体表面的水吸干,将叶片切成约5mm² 大小的小块,然后接种到不同激素浓度配比的培养基上。

1.2 启动培养

启动培养基是MS+蔗糖3%+琼脂0.8%,pH为5.8。培养温度为24~26℃,光照时间10~12h/d,光照强度1500~2000lx。

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继代增殖培养

2.1 愈伤组织的培养

将已灭菌的叶片接种在MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.25mg/L的诱导培养基上,经30d左右,外植体周围产生大量的白绿色愈伤组织。愈伤组织不断扩大,并在其表面出现绿色突起。这些愈伤组织继续培养到40d左右,绿色突起分化成芽,继而发育成芽簇或苗丛,并且不断产生绿色突起和丛生芽。

2.2 丛生芽的培养

小苗丛长到4~5cm时,将小苗剪下转接到生根培养基上(一般每瓶能剪下6~10个小苗)。再将剪完小苗的培养瓶盖好,继续培养20~25d,培养瓶内的小芽簇又可长到4~5cm,此时又可剪下6~10个小苗,反复3~4次后,瓶内培养基营养和水分基本耗尽,将瓶内小芽丛取出,切成3~4块,转接到新鲜的分化培养基上。这样反复培养下去,即可生产出成千上万株试管苗。


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生根培养

将分化的苗丛取出转接到生根培养基上,14d左右即可生出3~4条小根。生根培养基以1/2MS、B5、White作基本培养基,附加IAA0.5mg/L效果较好,其中B5、White培养基生根效果优于1/2MS。


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试管苗驯化移植

试管苗小根长到2~3cm时,放入大棚或温室内闭瓶炼苗15d左右,然后将瓶盖打开,3~5d后将小苗从瓶中取出,放入清水中洗净培养基,栽入配制好的营养土中,营养土以珍珠岩和沙子1:1混合,用营养液浇透。移栽后用薄膜盖好,保持80%相对湿度,5~7d后,逐步撤下薄膜,加强管理,15~20d即可移入大田定植。




编者按:本文来自曹春英主编《植物组织培养》,中国农业出版社,由小编整理发布,如有不妥,敬请告知!


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