一、外植体选择

在春夏之交（4-5月）选取吊瓜块根上萌发的幼嫩芽或藤状茎作为外植体。选择生长健壮、无病虫害的母株，剪取生长10天以内的幼嫩藤状茎顶部。

二、消毒处理：

1.剪取芽或藤状茎，去除叶片及卷须，切成一叶茎段。

2.流水冲洗20-30分钟，去除表面杂质。

3.在超净工作台内，用70%-75%酒精浸泡10-15秒。

4.用无菌水冲洗1-2遍。

5.用0.1%氯化汞溶液振荡消毒8-10分钟。

6.用无菌水冲洗3-4次，吸干表面水分。

7.剪去接触药液的茎段两端少许，待接种。

一、初代培养基

配方：MS + 6-BA 0.1-0.5 mg/L + KT 0.01-0.2 mg/L + IAA 0.05-0.2 mg/L + 0.5%琼脂粉 + 2-3%蔗糖，pH值5.8-6.0。

当6-BA 0.5 mg/L + IAA 0.2 mg/L时，腋芽诱导出苗率更高。

二、继代培养基

配方：MS + 6-BA 0.3-0.5 mg/L + KT 0.2-0.3 mg/L + NAA 0.01-0.1 mg/L + 0.5%琼脂粉 + 2-3%蔗糖，pH值5.8-6.0。

三、生根培养基

配方：MS+IBA 0.1-0.5 mg/L + 0.6%琼脂 + 15-20%蔗糖，pH值5.8-6.0。

当IBA浓度为0.5 mg/L时，生根率更好，平均侧根数最多。

一、温度

25±2℃。

二、光照

1500-2500lx，光照10-12小时/天，黑暗12-14小时/天。

三、培养时间

1.初代培养：25-30天，可长成4-5节带叶茎蔓。

2.继代培养：25-30天，可长成4-5节带叶茎蔓。

3.生根培养：20-30天，即可生根。

一、繁殖效率高

通过继代培养，小苗按几何级数增长，繁殖系数高。

二、种苗质量好

组培苗经过脱毒处理，性状整齐一致，芽头多，根系发达。

三、成活率高

诱导苗炼苗后成活率可达90%。

四、增产显著

相比传统繁殖方式，一般可增产50%以上。

1.操作全程需在超净工作台内进行，保持无菌环境。

2.消毒剂处理时间需严格控制，避免对外植体造成伤害。

3.接种时注意生物学极性方向，每瓶接种一个芽或一个茎段。

4.培养过程中定期观察，及时调整培养条件。

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